实验背景：小胶质细胞被认为是大脑中的主要免疫细胞，它们在碎片吞噬、神经元支持和突触修剪等关键功能中发挥着重要角色，这与阿尔茨海默病等神经系统疾病的发生息息相关。小胶质细胞的不同亚群在神经系统微环境中各自承担不同职能。虽然荧光显微镜技术可以区分其表型，但其耗时长、通量低且主观性强的局限性使其应用受限。单细胞测序平台能够进行高维分析，然而高昂的成本和复杂的数据分析技术也限制了这一技术的普及。为了解决这一问题，来自美国俄克拉荷马大学健康科学中心的研究人员，基于Cytek®Aurora™全光谱分析型流式细胞仪，开发出了一种高通量、简易且针对小胶质细胞的细致分型的完整解决方案。该方案可以灵活扩展加入更多标志物，并适用于不同的组织与疾病类型，此外，它还能够无缝衔接全光谱分选型流式细胞仪，选取感兴趣的细胞并支持后续的功能性实验。

检测小胶质细胞的完整流程如下：首先，制备单细胞悬液，使用组织消化酶处理相应组织样品，随后将组织解剖分离，并加入特定酶混合液。经过离心和过滤后，细胞被重悬并准备进行染色。在细胞染色的过程中，添加Fc受体阻断剂以防止非特异性结合，并在合适的条件下孵育以确保染色均匀。之后，加入特定抗体进行标记，并进行洗涤。最终，通过Cytek®Aurora™全光谱流式细胞仪对样本进行采集及数据分析。

在数据分析中，采用5激光的Cytek®Aurora™全光谱流式细胞仪进行样本分析，考虑到小鼠大脑组织高自发荧光的问题，分析软件中需启用提取自发荧光的功能。通过FSC/SSC信号排除碎片后，进一步基于经典指标CD11b+CD45Mid识别出小胶质细胞。根据不同标志物的表达，小胶质细胞被细分为四个亚群：稳态小胶质细胞（P2RY12+CLEC7A-），疾病相关小胶质细胞（DAM），干扰素反应性小胶质细胞（IRM）以及脂滴聚集的小胶质细胞（LDAM）。

这一实验方案在相关研究中得到了验证，研究人员观察到不同年龄与性别的小鼠海马体中的小胶质细胞丰度差异。发现年老雌性小鼠的DAM比例显著升高，而稳态小胶质细胞的比例与年龄关系不大，但在年老雄性小鼠中更为普遍。IRM比例与小鼠年龄密切相关，而LDAM的情况类似，年老雌性小鼠比例也更高。这一现象为研究阿尔茨海默症中的性别差异提供了潜在的免疫学证据，揭示了老龄化与疾病发展的相关性。

综上所述，基于人生就是博-尊龙凯时技术的这一流式细胞术方案，为进一步分析和理解小胶质细胞在神经疾病中的作用提供了有效的工具，助力生物医疗领域的研究进展。